LPS Extraction Kit 脂多糖提取試劑盒
產品信息:
試劑盒組成
LPS背景描述:
◆ 脂多糖(LPS)是革蘭氏陰性菌細胞壁外膜的主要成分,結構很復雜、熱穩定性*(在250℃下干熱滅菌2h才*滅活)。受LPS發現的歷史原因,如今LPS的概念幾乎等同于內毒素(endotoxin)。LPS由多糖鏈和脂質A組成,不同細菌間的多糖鏈是高度變化的,決定細菌的血清型;而脂質A主要影響LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的級聯反應和機體的毒性病理生理活動,包括釋放內毒素引起感染性休克從而導致末梢血管虛脫。臨床常通過檢測LPS的存在來診斷腦膜炎。
◆ 正是LPS與機體免疫機能的密切關系,生命科學研究常常提取LPS進行相關的研究,如闡明LPS的結構,代謝,免疫學,生理學,毒性,生物合成途徑;誘導生長促進因子如白介素的合成與分泌;誘導疾病研究的動物模型如炎癥反應,急性肺損傷,
產品描述:
◆ 常用的LPS提取方法仍然是Westphal,O. (1965)使用的熱酚-水法(hot phenol-water method),主要優勢在于高產量,但是提取步驟繁瑣,費時,以及常受蛋白質和核酸的污染,純度低等缺點也常困擾科研工作者。
◆ iNtRON提供的LPS提取試劑盒是市場上的*個商品化的產品,排除傳統熱酚-水法的缺陷,使得科研工作者能夠快速方便的從細菌中提取LPS。
產品優勢:
∷適用性廣,能從所有G- 菌中提取LPS(見Fig. 2);
∷操作時間短(包括裂解在內,60min內即可完成);操作簡單方便;
∷少量細菌即可獲得足夠的LPS;LPS產量與細菌培養物成正比,一般使用3~5ml培養物LPS產量高;細菌佳培養體積1~2ml(OD600=0.8-1.2)
∷LPS產率高,且重復性好(見Fig.1);
∷提取LPS下游應用廣,包括直接用于免疫刺激;
操作步驟:
1)室溫離心收獲細菌細胞,13,000rpm,30sec。
2)加入1ml裂解緩沖液(Lysis Buffer),劇烈渦旋混勻。
3)加入200μl露仿,劇烈渦旋混勻10-20 sec,室溫孵育5min。
4)4℃,13,000rpm離心10min,轉移400μl上清到新1.5ml離心管中。
5)加入800μl純化裂解液(Purification Buffer),并混勻。-20℃孵育10min。
6)4℃,13,000rpm離心15min。
7)用1ml 70%EtOH洗滌LPS顆粒,并*干燥。
8)在LPS中加入70μl Tris-HCL(10mM,pH8.0),并超聲。
應用圖片:
脂多糖提取試劑盒 iNtRON 脂多糖提取試劑盒 iNtRON 脂多糖提取試劑盒 iNtRON