- FSQ-301去基因組高效率反轉錄試劑盒TOYOBO
- 型號：kit
- 報價：9999999
- 地區：上海市
- FSQ-301去基因組高效率反轉錄試劑盒 ReverTra Ace qPCR RT Master Mix with gDNA Remover， 上海復申生物江浙滬授權代理商，常年現貨供應更多現貨熱銷產品訂購！FSQ-301去基因組高效率反轉錄試劑盒TOYOBO
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FSQ-301去基因組高效率反轉錄試劑盒
FSQ-301去基因組高效率反轉錄試劑盒TOYOBOFSQ-301去基因組高效率反轉錄試劑盒TOYOBO
ReverTra Ace® qPCR RT Master Mix with gDNA Remover(Code No. FSQ-301)是使用高效率逆轉錄酶「ReverTra Ace®」開發的Realtime PCR用的逆轉錄試劑盒。是含有逆轉錄反應必需的全部組分的5x濃度的*預混型試劑，只要添加模板RNA與水，就能迅速地開始反應。另外添加了能強力分解DNA的gDNA Remover，在逆轉錄反應前對模板RNA進行處理，就可以簡便地制備無基因組DNA的cDNA。zui適用于待檢測目的基因中存在假基因，或在跨越內含子位置不能設計引物，以及模板RNA中殘存有基因組DNA污染等問題時的Realtime PCR實驗。
FSQ-301去基因組高效率反轉錄試劑盒
特征
●與Realtime PCR試劑的配合性良好
采用了對Realtime PCR反應體系影響zui小的組分，即使在PCR中添加zui多20%的逆轉錄反應液，也可以得到很高的直線相關性。zui適用于表達量低的mRNA的高靈敏度檢測。
●簡便、迅速地去除基因組DNA
只要依次添加去除基因組DNA的試劑和逆轉錄反應試劑，約20分鐘就可以制得不含基因組DNA的cDNA。
●*預混型試劑
本品為放置于-20℃也不會凍結的*預混型試劑。只要添加模板RNA和水，就可以簡便高效率地合成cDNA，且重復性良好。
●容易配制逆轉錄反應的陰性對照
因為添附有相同的預混型no-RT對照，能夠方便地配制逆轉錄反應的陰性對照。
●可得到更廣的可定量擴增區域
將Oligo dT 與Random Primer按zui適比例預混，可均一、高效地在RNA全序列范圍內進行逆轉錄，因此可得到更廣的可定量擴增區域。
實驗例
1. gDNA Remover對基因組DNA去除效果的確認
為了確認gDNA Remover對基因組DNA的去除效果，按以下條件進行了逆轉錄反應，接著以β-Actin為目的基因進行Realtime PCR。結果顯示，用gDNA Remover處理(+)、逆轉錄(-)<以下③>的條件時，沒有擴增出現，可以確認基因組DNA已被去除掉。
●cDNA合成
試劑:ReverTra Ace® qPCR RT Master Mix with gDNA Remover
模板:自己制備的HeLa total RNA 0.5μg /10μl反應體系
條件:使用gDNA Remover添加(+)、或無添加(-)的4x DN Master Mix，進行gDNA去除反應之后，分別用5x RT Master Mix II或5x RT Master Mix II no-RT Control進行逆轉錄反應。
●Realtime PCR
試劑:THUNDERBIRD® SYBR® qPCR Mix (Code No.QPS-201)
模板:上述cDNA2μl/20μl反應體系(添加量10%)
Target:ACTB(188bp)
測定:Applied Biosystems 7900HT
2.與其他公司同類型產品基因組DNA去除能力的比較
在HeLa total RNA中添加過量的人基因組DNA，與其他公司同類型試劑盒進行基因組DNA去除能力的比較模擬實驗。結果顯示，ReverTra Ace® qPCR RT Master Mix with gDNA Remover在基因組DNA去除方面效果更加明顯。
●cDNA合成
試劑:ReverTra Ace® qPCR RT Master Mix with gDNA Remover(Code No.FSQ-301)及同類型其他公司的試劑盒2種
模板:HeLa total RNA(0, 1pg, 10pg, 100pg, 1ng, 10ng, 100ng, 1μg)+ 人 gDNA 100ng/20ul反應體系
條件:按各公司試劑盒的推薦條件進行
●Realtime PCR
試劑:THUNDERBIRD® SYBR® qPCR Mix(Code No.QPS-201)
模板:上述cDNA 2μl/20μl反應體系(添加量10%)
Target:ACTB(188bp)
測定:Applied Biosystems 7900HT
參考文獻：
1）K.Miyazaki et al.,J.Bacteriology.,185:2219−2226（2003）
2）A.Nezu et al.,Biochem.J.,263:59−66（2002）
3）S.Nakashima et al.,J.Biochem.(Tokyo),131:241−246（2002）
4）S.Atsumi et al.,EMBO J.,20:5453−5460（2001）
5）Y.Yabuta et al.,Plant Cell Physiol.,41:666−675（2000）
6）S.Lee et al.,Gene,245:253−266（2000)
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