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          • 蛋白酶K(核酸純化與電泳)
          • 型號:FS0351
          • 報價:200
          • 地區:上海市
          • 0
          • Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K(核酸純化與電泳) CAS : 39450-01-6 分子量 : 28.9 kDa 是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,生物實驗室常用酶之一。該酶在較廣的pH范圍內(pH4-12.5)均有活性。用于mRNA和DNA與蛋白質的分離。
          • 025-58690567
          產品詳細介紹

          Proteinase K, Molecular Biology Grade 蛋白酶K

          產品信息

          貨號

          名稱

          規格

          價格(元)

          FS0351-100MG     

          Proteinase K, Molecular Biology Grade蛋白酶K     

          100mg    

          200.00

          FS0351-500MG

          Proteinase K, Molecular Biology Grade蛋白酶K

          500mg

          800.00

          FS0351-1G

          Proteinase K, Molecular Biology Grade蛋白酶K

          1g

          1200.00

          產品描述

          蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,用于生物樣品中蛋白質的一般降解。從林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中純化得到。該酶有兩個ca2+結合位點,它們離酶的活性中心有一定距離,與催化機理并無直接關系。然而,如果從該酶中除去ca2+,由于出現遠程的結構變化,催化活性將喪失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染酸制品的蛋白質。所以,蛋白酶k消化過程中通常加入edta(以抑制依賴于mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化對蛋白酶k具有較強耐性的蛋白,如角蛋白一類,則可能需要使用含有1mmol/l ca2+而不含edta的緩沖液。在消化完畢后、純化核酸前要加入EGTA(ph8.0)至終濃度為2mmol/l,以鰲合ca2+。
          蛋白酶K,是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩定,還具有降解天然蛋白質的能力,因而它應用很廣泛,包括制備脈沖電泳的染色體DNA,蛋白質印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的pH范圍內(pH 4-12.5)均有活性。
          推薦反應緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。

          [注]!蛋白酶K配制標準:20mg/ml蛋白酶K配制標準(proteinase K):將200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,輕輕搖動,直至蛋白酶K*溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml,然后分裝成小份貯存于-20℃。

          產品屬性 

          CAS : 39450-01-6 

          分子量 : 28.9 kDa 

          英文名稱 : Proteinase K 

          外觀(性狀) : 凍干粉

          儲存條件 : -20℃,避免反復凍融,有效保證12月。

          活力:40mAnsom u/mg

          性狀:粉末,是一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關的絲氨酸蛋白酶,來源于白色念球菌(. Tritirachium album. ),具有很高的比活性。EDTA等鰲合劑或SDS等去垢劑不能使蛋白酶K失活,反而增強和穩定酶活性,并在較廣的PH范圍內(PH4-12.5)均有活性。在組織或細胞核酸分離時,使核酸酶(RNA和DNA)以及反應中其他酶失活。

          產品應用

          用途:生化研究。廣譜蛋白酶,95C加熱10分鐘,則*失活??商娲鶧EPC處理RNA抽提用的離心管和 頭,實現滅活RNase A的目的,也用于處理RNase-Free的水。充分降解組織或細胞中蛋白質分子特別是核酸,以達到釋放和萃取高質量核酸的輔助試劑。用于質?;蚧蚪MDNA、RNA的分離以及蛋白多肽印跡實驗。

          蛋白酶k的作用
          值得注意的是,蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質的作用,以增加探針與靶核酸結合的機會,提高雜交信號.但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時,都會對細胞的結構有一定的破壞,導致組織切片的脫落,細胞核的消失,從而影響雜交結果.EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用,解決上述出現的問題,并能達到理想的染色效果.

          孵育溫度為55至65℃,理想孵育溫度為58℃,孵育時間為15分鐘至48小時;理想孵育時間為2小時。

          注意事項
          為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
          用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。

          蛋白酶K(核酸純化與電泳) 蛋白酶K(核酸純化與電泳) 

           

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